客服热线:400-901-9800          客服QQ:4009019800          技术答疑     技术支持     质量反应     联络我们
首页 > 旧事静态 > 注释
好的流式数据要选对的标志方案
宣布者:北京yzcbet生物      宣布时间:2018-11-30

细胞在各自正常分化成熟的不同阶段以及活化进程中,其细胞膜外表均可表达供鉴别的特殊结构,即外表标志。流式细胞术在细胞外表分子的检测与剖析主要运用于免疫细胞及其亚群的检测与功用剖析;血液系统细胞外表标志的研讨;细胞群体及细胞外表标志变化的检测;细胞外表标志构成性质剖析。


细胞内或细胞核内染色结合流式细胞术剖析确定某些细胞内细胞因子或蛋白表达水平。剖析细胞内或细胞核内抗原的关键在于荧光标志的抗体能自在进入细胞内或细胞核内,且不能破坏细胞形状的完整性和坚持细胞内靶抗原不变。因此细胞内或核内染色的关键在于细胞固定和胞膜或核膜穿透。


抗原散布位置:

细胞外表抗原:CD分子、趋化因子、整合素、细胞因子受体、Fc受体

细胞内抗原:细胞因子等

细胞核内抗原:增殖细胞核抗原(PCNA)等


流式操作流程



抗体标志方法

1.直接标志法:在一定量细胞悬液中,直接参与衔接有荧光素的抗体停止免疫标志反响,参与缓冲液洗濯后,上机检测抗体荧光。

2.直接标志:在一定量细胞悬液中,先参与特异的第一抗体(纯化后的无荧光抗体),待反响完全后洗去未结合抗体,再参与荧光标志的第二抗体,生成抗原—抗体—抗抗体复合物,上机检测其上标志的荧光素被激起后收回的荧光。此方法中的荧光来源于二抗。


直接标志与直接标志比拟

比拟项目

直接标志法 直接标志法

标志步骤

一步 两步

抗体

荧光素偶联抗体 生物素偶联抗体、荧光素偶联SA

运用

常用 多通道剖析要求通道搭配时

优点

方法复杂、结果准确,易于剖析,

多目的共标志(非特异性染色少),

多用于临床标本的检测

缩小荧光信号、浪费抗体种类,

多用于科研标本的检测

缺陷

本钱较高

步棸多,细胞易丧失,二抗普通为多克隆抗体,

特异性较差,非特异性荧光背景较强,易影响实验结果。

※点击下载流式实验处置方案

※点击下载Bioss信号转导方向抗体此表格仅展现Bioss可用于流式抗体产品的称号与编号,每种抗体都有以下荧光标志产品Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 594、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7


版权一切 2016-2020 www.yzcbet.com 北京yzcbet生物技术有限公司 京ICP备05066980号 京公网安备110107000727号
经过国际质量管理体系ISO9001:2008 GB/T19001-2008认证    编号:00115Q211807R1M/1100