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免疫细胞分型罕见标志物大串烧(一)——T细胞分型标志物
宣布者:北京yzcbet生物      宣布时间:2019-8-12



免疫分型(immunophenotyping)是指依据存在于细胞外表、核或细胞质中的标志物或抗原的类型,应用基于抗体的对异质细胞群停止剖析,以鉴定多种目的细胞群的存在及比例。经过运用特异性识别不同细胞类型标志物或抗原的抗体,从而协助鉴定细胞的谱系。例如肿瘤标志物的检测、浸润免疫细胞的剖析、白血病的诊断等。免疫分型可以应用组织切片(新颖或固定组织)经过免疫组化方法以及应用细胞悬液经过流式细胞术停止剖析。

流式细胞术可以说是用于探测人类免疫表型的首选技术,特别是由于它可以在诸如血液的复杂混合物中经过测量许多单个细胞上的多个参数,从而鉴定和剖析包括稀有亚群在内的许多细胞亚群。并且由于可用的抗体试剂的扩展和实验方案的不时调整,流式细胞术不只可用于评价细胞外表蛋白的表达,还可以用于评价胞内蛋白的表达或修饰水平以及细胞因子的水平。



运用细胞外表标志的特定组合对免疫细胞亚群停止定义是一个不时开展的进程,特别是那些高频研讨的细胞类型。这些类型包括调理性T细胞(Treg)、分泌IL-17的T辅佐细胞(Th17)、树突状细胞(DC)和自然杀伤细胞(NK)。虽然新标志的发现和新的细胞子集将在未来一段时间内继续下去,但是,我们还是希望细胞免疫学范围具有足够的成熟水平,以到达对大少数共同研讨的免疫细胞亚群的定义达成共识。换句话说,应当可以定义一种相对动摇的标志集合,其描画T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞和DC细胞等主要类型。因此,我们经过总结文献确定各个细胞类型的关键分化标志,并且总结目前用于人体免疫监测的规范化免疫表型分型组合。




T细胞

T淋巴细胞可在CD3表达的基础上被免疫表型化,随后进一步细分(如CD8+杀伤T细胞和CD4+辅佐性T细胞)。此外,T细胞表型是灵敏的,可以不同的微环境发作变化;表型也能够堆叠在多个T细胞群体之间。此外,T细胞亚群的分类能够是依据照应某些抚慰或磷酸化免疫信号蛋白如STAT蛋白分泌特定细胞因子水平来确定


杀伤T细胞(又被称作细胞毒性T淋巴细胞CD8+)能识别抗原,这些抗原是由感染因子释放的,并与宿主细胞结合。杀伤T细胞可以识别多种细胞类型和病原体并与之相互作用。T细胞受体与外源抗原结合,触发细胞毒素向受感染细胞释放,招致细胞死亡。杀伤T细胞的主要鉴定标志物就是CD8+,但是假设需求依据不同生理形状下对杀伤性T细胞停止功用鉴定,还可以进一步添加其他标志物构成标志物组合。比如,对杀伤性T细胞进一步定义干练、中央记忆性、效应记忆性效应T细胞亚群的经典标志物是基于趋化因子受体7(CCR7;也称为CD197)和CD45RA或CD45RO的表达状况;对杀伤性T细胞进一步剖析其活化形状是基于HLA-DR和CD38的表达状况1-3


辅佐T细胞(即Th1、Th2、Th9、Th17和Tfh细胞)具有很少的细胞毒性活性并且分泌对其它白细胞(例如B细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞或中性粒细胞)起作用以肃清病原体的细胞因子。除了CD4这一共有标志物,不同辅佐T细胞还有各自的常用鉴定标志物组合,如下图所示:

调理性T细胞即Treg在维持免疫稳态中起着重要作用,并且也与许多自身免疫性疾病有关4。迄今为止,已确定了两种主要类别的CD4+Treg组成型表达CD25和FoxP3的自然Tregs(nTreg)以及诱导后激活表达CD25和FoxP3的诱导Tregs(iTreg)5。人和小鼠Treg的CD25表达状况不同。在小鼠中,一切CD25+细胞都被以为是Treg而在人的免疫系统,只要那些高水平表达CD25的细胞被以为是Treg6


iTreg来源于胸腺,在某些抗原和专门的免疫调理细胞因子(如TGF-1、IL-10和IL-2)的抚慰下,由单阳性CD4细胞分化为表达CD25和Foxp3的Tregs6。还报告了iTreg群体具有一定的可塑性,可以转化为其他T细胞亚型,例如Th1和Th17细胞6

目前,FOXP3是Treg的最明白的标志,虽然有报道发现少数Treg亚群是FOXP3-7。转录因子Foxp3作为Tregs的标志又进一步推进了其他的Treg标志的发现,包括CD127。若干已宣布的报告证明CD127表达与Foxp3呈负相关8。比如,应用CD4+、CD25+和CD127-组合分选战略,可用于取得体外可扩增的Treg细胞。


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参考文献:

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